Vitalnost spermija je posebno važna za uzorke s manje od oko 40% progresivno pokretnih spermija. Udio mrtvih spermija ne smije biti viši od odjela nepokretnih spermija pa sam test u tim slučajevima služi provjeri procjene pokretljivosti. Udio živih spermija je u pravilu viši od udjela pokretnih spermija. Na vitalnost spermija utječu dehidracija, promjena temperature i pH. U slučajevima necrozoospermia-e mora se izmjeriti pH ejakulata koji je prvi marker sumnje u narušenu vitalnost i shodno tome sumnju u pravilnu funkciju epididimisa i prostate. Vitalnost se uvijek veže i izražava u odnosu na pokretljivost spermija istog uzorka ejakulata. Veliki udio vitalnih ali nepokretnih spermija može ukazivati na strukturne defekte repa spermija (deficit mitohondrija itd.). Dobrim probirom nepokretnih ali vitalnih spermija kroz ICSI metodu fertilizacije moguće je ostvariti trudnoću.